類器官培養(yǎng)

服務(wù)介紹：

1.取6孔板中生長(zhǎng)好的類器官，每孔200個(gè)左右類器官（可以用6、12、24孔板等培養(yǎng)類器官，培養(yǎng)完成以后將同種處理的類器官合并收集，每種處理的類器官總數(shù)目不少于200個(gè)）。

注意：不要讓類器官過(guò)度生長(zhǎng)，形態(tài)小的類器官，才能更好地維持類器官的形狀。

2.移液器吸除培養(yǎng)基，用常溫的PBS 清洗一遍。

3.加入2mL冷PBSB (1×PBS+0.1%BSA) 輕輕吹打基質(zhì)膠使基質(zhì)膠盡可能融化。

注意：此過(guò)程在冰上進(jìn)行，基質(zhì)膠在低溫環(huán)境中會(huì)融化。

4.剪去1mL吸頭頂端使吸口變大，用移液器輕輕將重懸在冷PBSB中的類器官轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，冰上操作。

5.等基質(zhì)膠完全融化后放入垂直離心機(jī)中1000rpm/min離心3min，去上清。

6.加入2ml固定液重懸，常溫固定30min。

7.放入垂直離心機(jī)中1000rpm/min離心3min，去上清，可見(jiàn)類器官沉淀有綠豆大小。加入1.5mL無(wú)菌PBS將類器官輕輕重懸轉(zhuǎn)移至1.5mL離心管。

8.用緩沖氣袋包裹離心管，保存運(yùn)輸過(guò)程中輕拿輕放。